细工生物推选配方（全部即用现货）： DMEM/F12        细工生物  货号：12-719F    价钱：120元  （好意思国定制分娩，保种体系试剂） 胎牛血清        细工生物  货号：cc-3007.03-25ml  价钱：400元 （好意思国定制分娩，保种体系试剂，期骗在原代细胞中，代数与现象阐扬更优） EGF             细工生物  货号：cc102-100ug  价钱：478元（多家品牌，长年筛选统计后推选，保种体系试剂） EGF             细工生物  货号：cc102-1ML  价钱：2868元（多家品牌，长年筛选统计后推选，保种体系试剂） BPE             细工生物  货号：cc023-1ML  价钱：352元（多家品牌，长年筛选统计后推选，保种体系试剂，gibco体系LONZA体系培养基添加后有经营更优） BPE             细工生物  货号：cc023-10ML  价钱：2464元（多家品牌，长年筛选统计后推选，保种体系试剂，gibco体系LONZA体系培养基添加后有经营更优） insulin         细工生物  货号：cc101-5MG  价钱：225元（多家品牌，长年筛选统计后推选，保种体系试剂） insulin         细工生物  货号：cc101-50MG  价钱：975元（多家品牌，长年筛选统计后推选，保种体系试剂） hydrocortisone  细工生物  货号：cc103-1ml  价钱：47元（多家品牌，长年筛选统计后推选，保种体系试剂） Amphotericin B  细工生物  货号： CC002-3    价钱：300元(推选为原代细胞培养开导，与旧例两性霉素B不同处是，水溶级别（当今阛阓常用是DMSO溶，原料老本收支几十倍，收场更优） 以上成套按最小规格报价 推选： 增强型贴壁试剂   细工生物  货号：CAT:C028    价钱：300元(推选为原代细胞培养开导，原代案例，心肌细胞，神经元，胶质细胞） Optimized Trypsin细工生物  货号：cat:cc17.3  价钱：150元（多家品牌，长年筛选统计后推选，保种体系试剂，原代细胞，顺应半悬半贴细胞） 注：低浓度胰酶是我司一直推选浓度，随费时，后续细胞现象更优，减少机械力，胰酶化学作用消化可搞定细胞成团，团员等问题，少许雀斑一般是奏乐力过度，毁伤细胞幻灭后碎屑引起，肃穆这步，雀斑彰着会隐藏，成片雀斑，建议换血清与培养基体系） thle-3（atcc-crl-11233）细胞系是由原代正常肝细胞经sv40大t抗原感染而赢得--案例分析及建议 THLE-3细胞几点建议您参考。 消化：不要有机械力 化学作用让细胞消化散  咱们统计胰酶只须少数能达到这个要求 这点不知是否有肃穆到  咱们的OPTI胰酶顺应这个要求 分析配方建议是：3170+fbs咱们在其他几株原代上皮有期骗照实能搞定问题 ATCC列出这个配方讲明他们也存在很难的增殖情况才加血清有经营搞定 对于贴壁：咱们意见是这只细胞亦然像293T通常转染的大T抗原 这只也有贴壁不牢的问题 更为严重  是以用许多铺板试剂 类似案例咱们搞定过LMH细胞 这只须用明胶 咱们替换其他有经营搞定的，ATCC这个铺板试剂与方法及不赋闲，咱们建议用咱们增强贴壁试剂试试。（如非要按ATCC讲明作念，咱们建议都用GIBCO的）ATCC有经营亦然较繁琐，建议用咱们增强贴壁试剂替换（还无案例） 因子：对于上皮细胞添加咱们意见是BPE its 不了解成份作用的敦厚一定要肃穆加减，推选意义是其他几株上皮咱们统计有这几个因子都有有经营用过。 专利源流 -这些添加因子 顺应我跟您说牛脑垂体添加 氢化可的松等添加在以下文段都有讲明。 Cell proliferation is measured in a variety of the experiments described below. Thus, the methods used for such measurement are setforth as general methods. DNA synthesis is measured in cells inoculated at clonal density (100 cells/cm.sup.2). The medium is changed to fresh medium the next day and after two additional days of incubation [.sup.3 H]-thymidine (New England Nuclear) is added to the cell cultures at 0.5 .mu.Ci/ml. Twenty-four hours later the acid precipitable fraction is collected on glass fiber filters and the  amount of [.sup.3 H] incorporated is quantified by scintillation counting. Alternatively, proliferation is measured by counting the  number of cells in each colony. Medium is changed to the medium in which proliferation is to be assayed one day following inoculation  at clonal density and the dishes are incubated for a further 7 days. The cells are then formalin fixed and stained with crystal  violet. The number of cells per colony is determined and the population doublings per day is calculated as previously described (13) 血清质料相关推选：种子库永恒评测统计 半量换液-意义源流如下两点 一：专利先容   -通过查专利要求以下段，顺应我跟您说的半量换液 Harris CC, et al. Human liver epithelial cells. US Patent 5,759,765 dated Jun 2 1998   --专利称呼 2) culturing one-half of cells of step (1) in a medium containing said compound to be evaluated; 3) culturing the remainder of the cells of step (1) in a medium lacking said compound to be evaluated; 二：ATCC crl11233 先容 The cells express cytokeratin 18 and albumin in early passage, whereas higher-passage cells in logarithmic-phase growth also express  ytokeratin 19.Ref     -ATCC crl11233 先容 接待本事交流，该类细胞培养问题长年统计。（组织保存，消化，培养） 国内细胞现象统计一些小建议-血清 高质料的血清：应该是细胞出现问题能搞定问题，并能抓续保证质料一贯性。 与许多敦厚意见：其他细胞都能抚育，就这个细胞养不好。巧合相背，建议评审条目巧合相背。如能永恒慈祥这种问题，筛选出的血清质料收场亦然最可靠的，就像咱们出现问题能意想的那款血清，为啥这款血清能够完成果真通盘问题搞定，几十年质料一致性，批间差果真为零。这种血清才是高质料血清。 接待与长年从事细胞质料要求高的实验室一皆搞定各式问题，当今本事、试剂、瞎想、方法已相对熟习。国内从从细胞建系运行的本事锤真金不怕火照旧相当熟习了，我司当今当今追踪统计的原代细胞建牵挂牵路瞎想及实验照旧有几年了，真确的熟习还要作念许多的责任。我司十年的基础实践统计，接待您的参与与扶携。 进展20210917：原代建系要求本事全面性， 用国内库建的细胞系在建系，先摸条目相对容易，见遵守会大许多，统计追踪过几个用户统计追踪过，养十几代没问题（有几个生手也能养不少代）离体后处理这步也挺难的，肝上皮建系咱们一直在统计，ATCC那几个熟习系在国内养的不是很好，统计许多年了，看了部分先容，其他几个正常组织细胞系养的也不是很告成，几点枢纽问题可商议，密度扼制，贴壁不牢，容易成团，保种不可功，是传代几个较枢纽问题，离体处理，消化，冻存，这几部用的试剂手法，咱们一直在优化，有契机寄试用可比拟 二倍体跟原代类似，最佳把问题及潦倒操作设施列下，我回话下，否则说的较多，不知你需要的阿谁要点，或者问题要点。疏通前建议都是较好的试剂耗材，否则疏通不准确 举例培养基相关，DMEM-F12很畸形协和库敦厚许多年前给的参考是现用现配比制品好用，测试统计十几年，如故弄不出入口厂家通常的培养基，这个是咱们本年搞定的要点。 举例转染相关免疫悬浮类（原代类）难点，转染，容易成团，保种难，对试剂手法都很抉剔， 咱们有试剂，手法，和意义都可说光辉，您在上实验比拟，细胞现象取好所在，最能讲明问题。 20211101：统计巨噬相关培养建系，漫衍在各组织中巨噬也被称为类上皮，通过统计学习到，外洋磋议在畜牧行业照旧相当熟习了。但愿与诸君能手请示扶携互助。咱们在基础培养上有些上风，但愿互助国内巨噬建系相关互助。国内各细胞库建系教学也不比外洋差了。 20231220：基于DMSO优化后，针对二倍体系，原代，类器官单细胞冻存（球体冻存难度大），免疫类细胞原代，系优化，PBMC等，办法提高长年后液氮冻存种子活率。 20230116细胞中问题痛点参考，养原代有积极酷好。 系问题对于雀斑，系滋长慢参考 问题对于雀斑 细工建议参考，用对试剂耗材（种子库级别细胞不建议用低廉试剂，保种上百只种子细胞，也用不了若干钱的）胰酶柔软处理（幸免枪顺利奏乐细胞毁伤亦然较进犯方针参数），几代或十几代后，雀斑会全部隐藏。这个建议也仅仅救助办法参考建议，阅历过雀斑的细胞，建议再行保种国内正规库源流细胞。 系滋长慢参考     细工建议参考 给出有经营是入口瓶培养（康宁，nunc,德国产细工全部现货） ，种子库级别试剂（三千以上胎牛，我司考证五年以上南好意思）我司培养基或者是GIBCO培养基，放足培养基（多些也不关键）几天不动，看下收复情况欲望，鸠合我司胰酶（无损消化）传几代应该能找回较好现象，该方法也顺应细胞养几代后就爬爬这种情况（上述方法也顺应细胞养传代后细胞就爬爬这种情况，该身分原因许多，具体情况集体分析）该方法也建议原代首代培养（类器官）等于正常培养基加胎牛（因子贵，lag phase长、无血清不稳点）全部能替代，细胞够多或赋闲后在上无血清可作念参考。类器官配套耗材U型低（不加赞助条目成球）及磁珠配套磁力成球可来信见知索求良友及本事商议。邮件相关 上述念念路搞定要告成，来信见知，当今统计进面试剂耗材见效案例，有细胞滋长慢，雀斑案例都误以为是支原体，互助实验室比拟熟悉培养体系，期骗后，任何问题都莫得，等于复苏初期敦厚比拟心急，没按正常传代后，皿居多，三天以上后，pH变化较快，影响了背面滋长。如考证，到任何问题难点都可来信商议。如有梦想趋势滋长，胰酶建议用0.05或者我司胰酶（上皮类成片搞定要柔和，旧例0.25浓度容易消化成细胞泥，膜毁伤利弊，对细胞毁伤很大，影响救助） 上述顺应以下问题备份组 咱们会统计更多难点期骗有 成瘤不睬想细胞株 耐药株复苏救助 细胞养几代后就爬爬这种情况 该意义来自类器官培养统计，及底下各种难养株长年统计，底下履行有需要的可来信见知。我发您，要有针对的痛点难点，咱们会补充更多良友。 救助细胞系建议源流国内正规库，公司源流差许多。如照管我司买卖永恒订购试剂，咱们可送国内库同类细胞株作念奖励，我司本年试剂通盘原料都是临床原料级别。能到种子库级别。 如考证告成，细节图片及细节能否发在丁香园这个畅通里，咱们统计履行也为更好劳动每一位用户少走弯路。咱们还有相应的奖励。 https://www.dxy.cn/bbs/newweb/pc/post/20665506?replyId=26300800 【原创】共同探讨完成国内细胞统计 20240604 成瘤不赋闲文件补充 当单一的畸胎癌细胞培植到胚胎上时可以长成良性组织(Kleinsmith and Pierce，1964)，这教导在飘动的细胞中表型改变是可逆的。 甚而指令分化赓续被推选作为肿瘤赈济的模子(SpremulliandDexter, 1984;Freshney,1985;Marks and Breslow,2007;Piccirillo et al.,2006; Wang et al.2008:Kangetal，2014)。 北医白凡，生物物理所-李翀敦厚，10-1000个细胞成瘤五六年前文件可查下,需文件可来信见知。 文件参考 017-2015-CSC-lncTCF7 024-2016-Cancer Res-GALNT1 原代建系更新参考 组织-细胞要点 1：离体处理，建议手术刀比肩两三个固定后，冰上最快速率处理，建议十分钟内入皿。 2：岂论哪种培养体系，都要有一组含血清，这个每个实验室都很熟悉，上清前几代留着，背面建系中，细胞受损后救助（冻存复苏，永恒培养驯化流程中细胞现象差等救助），类器官，无血清有经营两年统计收场给出含血清参考。含血清上风是可行，每个实验室都熟悉相关鼓胀的教学与问题搞定，还可预知效，大批细胞拿到，有充足的细胞后，在评测无血清。 3：冻存复苏：建议两指厚面包裹后顺利负80后，第二天液氮，有泡沫冻存盒裹在棉花外面收场更好，建议平时冻存复苏评测。较抉剔的有免疫细胞，原代等测试收场比拟好，无血清有经营，建议新型冻存方法评测比拟。 4：建系病毒要点：高滴度。 5：手段参考：要对细胞镜下格局熟悉（或者先筛选办法细胞有个大意判断后），可无谓分离液，流式等前期筛选，单克隆多作念些，等大批培养后在作念相关检测，幸免分离液化学毁伤，流式机械毁伤而使细胞建系培养不堪利问题。大大提高见遵守，上述1-3是组织到细胞，4是难感染细胞痛点，要能谐和上述要点，类似实验容易并可行，亦然建系粗陋类似枢纽。 组织-细胞    细胞-组织   难养细胞系参考统计，上皮，SV40 （原代要熟悉培养秉性，巧合与难养系长满传代时代一致。）缺氧培养期骗上风整理中，缺氧培养上风是成干后，细胞分化规章办法（相关文件建议作为干后动物模子考证） 6：传代培养肃穆：千万别按细胞系传代俗例，老是拿出来开看细胞（这点尤为进犯，关乎成败）建议多放50%皆备培养基后，4-7天传代合适，成纤维，内皮，上皮首代消化辛苦，建议斟酌组织-细胞处理设施影响的组织活性，举例操作设施全程冰上，快，（消化液礼聘分歧适，时代过长等身分），树突，kuffer，难消化建系工业用途可来信见知，这类咱们可试完成建系难点痛点建系（咱们拿本事换口饭吃） SV40建系培养特色，细工本事储备充足（国内建系作念本事储备），如您建系也用SV40,如遭受问题，可商议。问题鸠合统计有些共性，也有组织秉性，可商议。 东谈主肾皮质近曲小管上皮细胞；HK-2    东谈主乳腺上皮细胞；MCF-10A     东谈主肺正常上皮细胞BEAS-2B     东谈主肝癌细胞；Hep G2 [HepG2] 上皮样      东谈主胚肾细胞；293 [HEK-293] 上皮样   东谈主脑星形胶质母细胞瘤；U-87 MG [U87MG；U87 MG] 上皮样 后期相关问题统计 保管培养：保管培养考证建系，种子库等进犯实验试剂筛选推选，细工里面期骗保管培养，在高产卵白，培养基血清试剂评测种子库，分娩期骗作念本事评测，外泌体期骗，噬斑工业期骗都取得了可以的收场。 规章分化：缺氧，成干，保管培养期骗后续在统计商议 离体后开关通路（细工优化胰酶搞定这个问题，胰酶经过各式胰酶明锐细胞系永恒统计筛选，胰岛胰腺类细胞系），亦然离体后首代培养关乎成活枢纽。 成干考证，减血清，增长速率很有参考酷好。更多分化延展。 当单一的畸胎癌细胞培植到胚胎上时可以长成良性组织(Kleinsmith and Pierce，1964)，这教导在飘动的细胞中表型改变是可逆的。 甚而指令分化赓续被推选作为肿瘤赈济的模子(SpremulliandDexter, 1984;Freshney,1985;Marks and Breslow,2007;Piccirillo et al.,2006; Wang et al.2008:Kangetal，2014)。 痛点补充讲明 1：离体处理推选设施补充，该有经营来自成团成片细胞系，原代问题统计，2010年运行。   统计了从2005年国内湘雅胰岛胰腺原代，2010运行统计胰岛胰腺细胞系（分离成单个容易活，胰泡，组织粘连阻拦易增殖，传代。搞定这类问题，我司配套胰酶消化居品开导来自这些问题，该类同理问题是细胞工场大面积消化（五年工业期骗），所需消化时代长，前后消化细胞要保证一致，膜受损一致（旧例0.25浓度胰酶，对膜毁伤导致前后细胞质料不一致）每本细胞培养竹素及泰斗细胞库先容最常用一句是，细胞变形后偶然远隔消化，当今各式胰酶原料源流折柳也很大，相关评价过几个大厂原料，咱们坚抓原始原料能作念到，超永劫期消化，充分消化成团成片，横竖消化一致并细胞膜无损，背面有兴味敦厚可商议上皮类这类问题可考证。 上皮类细胞系SV40建系培养特色、胶质类细胞系、正常组织细胞系 有时代考证益处是，原代首代培养考取一代处理枢纽身分。难养系常见问题。 长年统计相关推选：许多问题案例讲明首代消化不下来，组织离体处理设施过于繁琐，时代过长，影响的细胞活性，还建议无谓化学成份，机械力骚扰，（淋巴细胞分离液类，流式）细胞活性会更高，加正常培养基加含血清有经营，保守的说传十代不可问题，胚胎类源流，精确手法，四十几代没问题。 羼杂细胞培养在一皆，背面详备先容粗陋易行，单克隆几十个或上百个各种办法细胞，成纤维，上皮秉性。离体滋长告成培养无BUG推选。后期补充单克隆推选potocol. 单克隆后稳转株建系，超量加药筛选，传代加药，复苏加药，痛点全部用充足的本事储备建议参考建议及期骗案例。后期补充稳转株推选potocol. 保管培养考证种子库级别试剂优略对建系有经营要点讲明，吞并理念，对有经营实施相当枢纽。后期补充保管培养考证对种子库进犯性。 冻存复苏要点，后期补充冻存复苏考证对建系进犯性。 后期补充良友有案例问题的都可提前商议，问题实战最能讲明可行性。 咱们前景是皆备国内建造工程系，梦想有劝服力的考证样子是五家以上实验室同期考证有经营可行性（接待诸君敦厚同学雇主参与加盟），粗陋易行类似考证，可通过各种培养中问题商议，试剂，耗材，培养环境，本事储备等 20240605

细胞培养上清回输可能原因有两种，一是分泌促滋长因子；二是开释竞争性信号，刺激细胞增长，这亦然细胞太稀不易滋长的原因。建议：原代复苏首代救助，转染后死细胞过多等相关救助。 20240612 原代建系（本事储备充足后续作念建工程系），当今细工本事储备表面上，无bug有经营实行（该有经营来自以下问题特色细胞竖向统计）。 国内各地运行，同步考证每个地区五个团队以上，商议痛点难点可行后同步实验考证，包括各地区生物药首创东谈主，要点室。 各部位从组织到细胞，成纤维，上皮，腺类 触及统计良友、 二倍体细胞系培养特色讲求（成纤维） 乳腺癌、肝癌、免疫悬浮，淋巴瘤、胰岛胰腺、（上皮） 原代痛点难点：离体处理、单克隆、稳转株、耐药株、冻存复苏优化 建系用病毒效价质料圭表评价， 涉过甚他实验痛点难点：保管培养、高滴度卵白病毒分娩、晶体磋议、 SV40 MEF 大T抗原 纯化后卵白保护、 原代免疫类、原代正常类、胶质类、 常用贴壁试剂：胶原、明胶、多聚类，粘粘卵白、Matrigel基质胶、 细工开导促贴壁试剂不同处，毒性果真莫得（救助难养株案例五年统计）超长保管培养。 搞定易成团成片问题，这类问题影响细胞活率，保管培养、转染遵守不高欲望，冻存复苏活率低。种子库细胞活性保管、单克隆反复珍视（浮浅单克隆法有需要来信见知实验室称呼），鸠合最近几年热点磋议痛点问题统计：PDX、单细胞、类器官、给出相关问题表面与实战案例参考，梦想现象是平时培养流程中的问题考证收场最佳，先有案例问题搞定，背面期骗会更得当，并可行、易行 易成团成片常见系统计如下： 神经胶质类系（BV2,A172,U87MG、U251、TJ905、HS 683、H4、GOS-3、C6、原代上皮首代 各种难养系及原代上皮类:原代上皮首代、SV40、大T抗原系，293、HUN7、HEPG2、HEP3B 免疫悬浮类：THP-1，RAW264.7,JURKAT,HuT 78、RAMOS(RA.1)、NTCC721.221\IM-9、SU-DHL-4、KMYF、DCS 腺类原代、细胞系（腺癌、结直肠腺、前线腺、内膜腺、肾上腺、胸腺、胰腺 腺癌 东谈主乳腺癌细胞；  MCF7、MDA-MB-231、MDA-MB-435S、MDA-MB-453、MCF 7B、MDA-MB-157、SK-BR-3、MDA-MB-468、BT-20、MDA-MB-415、MDA-MB-436、MDA-MB-361、HCC1937 东谈主乳腺导管癌细胞； ZR-75-1、HCC38、ZR-75-30、T47D [T-47D]、BT-549 [BT549] 东谈主乳腺导管瘤细胞； UACC812、BT-474、MDA-MB-175Ⅶ、MDA-MB-134Ⅵ 东谈主乳腺上皮细胞；MCF-10A、DU4475 东谈主整合SV40基因的乳腺上皮细胞；HBL-100 [HBL100] 东谈主结直肠腺癌细胞；  Caco-2、HCT-8 [HRT-18]、HT-29、COLO 205、COLO 320DM [COLO320DM]、HCT 116 [HCT116]、LoVo、SW480 [SW 480；SW-480]、SW620 [SW 620；SW-620]、HCT-15 [HCT15]、LS 174T [LS174T]、COLO 201 东谈主结直肠腺癌瘤株；HCT 116 [HCT116]  东谈主前线腺癌细胞 DU 145 [DU145；DU-145]、LNCaP、Vcap、PC-3、2B4 东谈主前线腺癌细胞 22Rv1、DU 145、 VCaP、PC-3 东谈主前线腺癌高改动细胞株；PC-3M IE8、小鼠前线腺癌细胞；RM-1、东谈主正常前线腺基质长生化细胞WPMY-1、东谈主正常前线腺上皮细胞RWPE-1 东谈主卵巢腺癌细胞；SK-OV-3、OVCAR-3     东谈主乳头状卵巢腺癌细胞；Caov-3 东谈主子宫内膜腺癌细胞； HEC-1-B [HEC-1B；HEC1B]、KLE、Ishikawa、HEC-1-A 东谈主子宫内膜低分化腺癌细胞；EAG3 东谈主肾上腺皮质癌细胞； SW-13 东谈主十二脂肠腺癌；HuTu-80、东谈主肾细胞腺癌细胞；ACHN、东谈主子宫内膜低分化腺癌细胞；EAG3、大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞；PC-12 [PC12] 甲状腺  东谈主甲状腺鳞癌细胞；SW579 [SW 579；SW-579]、东谈主髓样甲状腺肿瘤细胞；TT、东谈主滤泡状甲状腺癌细胞；FTC-133、东谈主低分化甲状腺乳头状癌细胞；B-CPAP 东谈主甲状腺癌细胞（未分化）、8305C、ACT-1、（乳头状）B-CPAP、BHT-101、C643、CAL-62、HTh-7、Hth83、KHM-5M、KMH-2、KTC-1、Ocut-2C、TTA1、ARO、FRO 东谈主甲状腺鳞癌细胞SW579 [SW 579; SW-579]、东谈主髓样甲状腺肿瘤细胞；TT 胸腺：东谈主胸腺激酶弱势型细胞；143TK-、犬胸腺细胞；cf2Th    中国食物药品检定磋议院 肾上腺：SW-13、    东谈主肾上腺皮质腺癌细胞；NCI-H295R    、东谈主肾上腺神经母细胞瘤细胞(脑改动)；KP-N-NS、红色荧光卵白和萤光素酶标志的SW13-luc2-tdT    、大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞；PC-12 [PC12]    、 胰腺 ：    东谈主胰腺癌细胞；PANC-1；东谈主胚胎胰腺组织源流细胞；CCC-HPE-2    ；东谈主胰腺腺泡上皮癌；HPAC；东谈主胰腺癌细胞；AsPC-1；东谈主胰腺导管癌细胞；CFPAC-1；东谈主原位胰腺腺癌细胞；BxPC-3    ；东谈主胰腺癌细胞；HS 766T    ；东谈主胰腺癌细胞系；SW 1990 肺腺：    东谈主肺腺癌细胞；Calu-3    、东谈主非小细胞肺腺癌细胞；NCI-H157    、东谈主低分化肺腺癌细胞；SK-LU-1、东谈主非小细胞肺腺癌细胞；NCI-H1975、东谈主非小细胞肺腺癌细胞；NCI-H2087、东谈主肺腺鳞癌细胞；NCI-H596、东谈主肺腺癌细胞；NCI-H2009 就要点原代培养中常见痛点问题：细工前边已有先容部份，搞定有经营商议雀斑，滋长慢、成瘤不赋闲、离体首代消化不下来、浮浅单克隆法、稳转株筛选法、冻存复苏，都有充足本事储备。平时培养流程中问题搞定接待商议。 前期相关各式难点痛点都可商议与考证（邮件疏通，注明实验室称呼，无血清体系有经营表明，考证时代相对长）